Sitzungsberichte der
Heidelberger Akademie der Wissenschaften

Karl Freudenberg und Hans Molter:

zeigen. Das Präparat führt die Bezeichnung Apöe. Aus den obigen
6 g erhielt man 630 mg ApbE bei 73 % Ausbeute.
Es wurde nun untersucht, ob eine zweite ähnliche Blei-Alkohol-
fraktionierung des Materials ApbE eine weitere Anreicherung der
Wirksamkeit bringt. Dabei ergab sich eine gleichmäßige Verteilung
der Substanz auf die verschiedenen Fraktionen, sodaß eine An-
reicherung nicht zu erzielen war. Dieses Produkt läßt sich mit
Silbernitrat und Alkohol weiter fraktionieren.

5. Fraktionierung mit Silbernitrat und Alkohol.

Zur hellgelben Lösung von 600 mgApbE in 16 ccm Wasser
werden 4 ccm wässerige Silbernitratlösung (25prozentig) zuge-
setzt. Hierzu wird in steigenden Mengen Alkohol eingerührt. Bei
einem Zusatz von 25 ccm Alkohol beginnt sich die Lösung zu
trüben, nach weiteren 5 ccm ist ein äußerst feinverteilter Nieder-
schlag ausgefallen, der abgeschleudert wird (bis 60 % Alkohol).
Es wird dann noch weiter fraktioniert innerhalb der Grenzen von
70, 81 und 90% Alkohol. Die Niederschläge werden in wenig 2 n
Ammoniakwasser aufgenommen und mit der 10-fachen Menge Al-
kohol wieder ausgeflockt, wobei das Silber großenteils gelöst
bleibt. Die Niederschläge werden abgeschleudert und mit wenig
n-Salzsäure zersetzt. Vom Silberchlorid wird abgeschleudert und
jede salzsaure Lösung in Alkohol unter Rühren eingetropft. Die
Substanz fällt in feinen weißen Flocken aus.

Ergebnis:
1. Fraktion (bis 60%)
2. Fraktion (bis 70 %)
3. Fraktion (bis 81 %)
4. Fraktion (bis 90 %)

25 mg
10-fach angereichert
= 41.7 %
95 mg
2-fach
= 31.7 °/(
36 mg
2-fach
= 12.0 °/(
20 mg
% d. Ausgangs-
substanz
= 1-2%

86.6 %

Die Restlösung wurde eingeengt und wie die Silbernieder-
schläge aufgearbeitet. Diese Substanz war fast unwirksam. 86 %
der Wirksamkeit wurden wiedergewonnen, davon fast 42% in
der ersten Fraktion (bis 60 % Alkohol). Diese Substanz zeigte
im Test eine stabile Hemmung für 7roA Die vorliegende Substanz
(25 mg) entspricht etwa 100 bis 150 Litern normalem Harn von
Individuen der Blutgruppe A. Die Anreicherung, bezogen auf
4,5% Harn-Trockensubstanz, beträgt auf dieser Stufe ungefähr
76 000: 1, bezogen auf die oben erwähnten 15 g Ausgangsmaterial
beträgt sie 70:1.