DOI Kapitel:
III. Förderung des wissenschaftlichen Nachwuchses
DOI Kapitel:B. Das WIN-Kolleg
DOI Kapitel:4. Forschungsschwerpunkt
DOI Seite / Zitierlink: https://doi.org/10.11588/diglit.66333#0295
Das WIN-Kolleg
311
Blastula- bzw. frühen Gastrula-Stadien (Stadium 9—10) werden die animalen Kappen
aus den Embryonen explantiert und auf unterschiedlichen Oberflächen für minde-
stens 29 Stunden kultiviert, bis die Geschwisterembryonen Neurula-Stadien erreicht
haben (1).
Für die Epithel-Kulturen werden Lipid-Oberflächen funktionalisiert. Dabei
werden biomimetische Lipid-Membranen, die auf einen Festkörper gestützt sind, für
die ersten Versuche verwendet (2a). Hier wurden Mischungen der Lipide SOPC
(l-Stearoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phospocholin) und DOGS-NTA(Ni) (1,2-Dio-
leoyl-sn-glycero-3-[(N-(5-amino-l-carboxypentenyl) iminodiacetylsäure)-succinyll]
(Nickel Salz) in verschiedenen Verhältnissen verwendet. An den NTA-Ni-Komplex
der DOGS-NTA-Lipide können jeweils zwei Histidine eines Proteins mit His-Tag
binden (2b), das dann der Membran eine gewünschte Funktionalität verleiht. Als
Protein wurde zunächst die mit einem His-Tag hergestellte, extrazelluläre Domäne
Abb. 2: a) biomimetische Lipidmembran; b) Bindung der His-Tag Proteine an NTA-Ni-Komplex
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Blastula- bzw. frühen Gastrula-Stadien (Stadium 9—10) werden die animalen Kappen
aus den Embryonen explantiert und auf unterschiedlichen Oberflächen für minde-
stens 29 Stunden kultiviert, bis die Geschwisterembryonen Neurula-Stadien erreicht
haben (1).
Für die Epithel-Kulturen werden Lipid-Oberflächen funktionalisiert. Dabei
werden biomimetische Lipid-Membranen, die auf einen Festkörper gestützt sind, für
die ersten Versuche verwendet (2a). Hier wurden Mischungen der Lipide SOPC
(l-Stearoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phospocholin) und DOGS-NTA(Ni) (1,2-Dio-
leoyl-sn-glycero-3-[(N-(5-amino-l-carboxypentenyl) iminodiacetylsäure)-succinyll]
(Nickel Salz) in verschiedenen Verhältnissen verwendet. An den NTA-Ni-Komplex
der DOGS-NTA-Lipide können jeweils zwei Histidine eines Proteins mit His-Tag
binden (2b), das dann der Membran eine gewünschte Funktionalität verleiht. Als
Protein wurde zunächst die mit einem His-Tag hergestellte, extrazelluläre Domäne
Abb. 2: a) biomimetische Lipidmembran; b) Bindung der His-Tag Proteine an NTA-Ni-Komplex